GSL Biotech SnapGene是一款专业的分子生物学软件,这款软件提供了设计引物,酶切位点,氨基酸翻译,密码子优化,序列当地或者网上blast比对等功能,还可以搜索和自概念feature和导入之前的所有引物,功能十分强大!
In|Fusion克隆:一种多功能,多功能的方法,可创建无边界基因连接。 SnapGene是第一个模拟这种办法的软件。仅需选择你想要混合的DNA片段,程序就会设计它。
GibsonAs百度竞价推广bly:很多研究职员正在将Gibson装配转换为质粒而不用限制酶。 DNA片段通过PCR连接以干扰。
PCR和诱变:引物设计后,它们可用于常规PCR克隆,共PCR扩增或诱变。得到的DNA序列文件可立即用于进一步操作。
自动文档:自动记录模拟项目中的步骤。每次编辑或模拟序列时,此办法都会自动记录在图形历史记录中。模拟DNA的结构后,你可以用历史作为实验策略。
琼脂糖凝胶电泳:用一流的算法创建逼真的琼脂糖模拟。有限部分以三种模拟凝胶格式,数字列表和序列图显示。你可以用此模拟凝胶来规划诊断约束或将图像与预测模式进行比较。
第一介绍Snapgene的主要界面:
最下方的视图栏:
(点击下方的图标按钮可以进行相互切换)
最上方的菜单栏:
对应的功能如下:
Map:显示图谱
Sequence:显示序列信息
File:打开、打造、保存有关文件等
Edit:编辑功能,包含复制选中一些序列等
View:切换几个视图等
Enzymes:显示、选择酶切位点等
Feature:显示、增加(命名)一些片段等
Primers:添加引物等Action:插入融合一些片段
Tool:模拟电泳、序列比对、查询DNA分子量、查看简并密码子、氨基酸等
然后大家介绍这个软件的四个视图:
视图1、Map
直接打开任一质粒图谱(以pUC57为例),点击Map按钮,得到如下界面:
:显示酶切位点。点击该按钮,得到如下界面。
:显示质粒图谱的开放阅读框及转录方向。点击该按钮,得到如下界面:
:显示ORF的片段大小、GC%值等一些信息。点击该按钮,得到如下界面:
视图2、Sequence
点击Sequence按钮,得到如下界面:
:显示编码的氨基酸序列。点击该按钮可以切换氨基酸的全名和缩写。
:点击该按钮,选择All6 frames,可以得到所以所有序列编码氨基酸的状况。
视图3、Enzymes
点击Enzymes按钮,得到如下界面,可以看到不同酶切位点在序列中地方:
视图4、Features
点击Features按钮,得到如下界面,显示一些常用元件(含元件的地方、大小、功能等信息):
这次大家所讲的这类功能,主如果在最上方的菜单栏进行操作完成:
1、批量添加不一样的酶切位点
1.点击菜单栏Enzymes→ChooseEnzymes,可以有选择的显示不一样的酶切位点。
2.点击RemoveAll,清空右边的内切酶,在左边框内选择需要显示的内切酶进行添加。
2、对片段进行命名
1.在sequence视图,选中需要命名的序列,点击菜单栏Feature→Add Feature,弹出以下窗口:
Feature:给该片段命名。
Type:选择该片段的种类,点击右边箭头选择不一样的阅读方向。
Color:选择颜色。
3、给质粒图谱增加引物序列
1.点击菜单栏Edit→Find(或Ctrl+F),输入引物序列,找到质粒序列对应地方。
2.点击Primers→Addprimer,弹出该界面:
3.按上下游引物选择TopStrand还是BottomStrand,在Primer处可给该引物命名,随后即可显示该引物在图谱Map中的地方,也可以将常见的通用引物建到一个txt文档中,借助importprimer from a list 进行添加。
4、模拟标准限制性克隆
1.打开被插入片段的质粒图谱,选择适合的两个酶切位点,如xbal和EcoRV,点击菜单栏Actions→InsertFragment,点击xbal+Shift键+EcoRV。
2.点击Insert,在sourceof fragment处选择插入的目的片段来源。
3.点击上述同样的酶,给该重组质粒命名,点击clone。
5、模拟融合克隆
1.打开一个需要插入片段质粒图谱,点击菜单栏Actions→Insert One Fragments,弹出以下窗口:
2.切换到sequence视图,找到想要发生替换的位点。
3.点击Insert,在Source of Fragment处选择拼接或替换片段的另外一个质粒图谱。此时弹出另外一个质粒图谱图样。
4.点击用于替换的片段,察看该片段阅读方向与被替换质粒位点的方向是不是一致,如不同,点击更换方向。
5.选择后,点击Product,点击Choose Overlapping PCR Primers,此时即形成融合后的质粒图谱。
6、模拟电泳功能
1.点击菜单栏Tools→SimulateAgarose Gel,显示如下界面:
2.点击MW可以选择不一样的Marker,其中点击1.2.3.4……分别代表不一样的泳道,通过选择不一样的酶切位点,模拟每个泳道的电泳结果。
3.以第一泳道为例:点击选中line1,选择BanI、BfaI两个酶切位点,得到模拟电泳结果,如下图:
7、序列比对功能
1.打开一个原始待比对的序列片段,点击菜单栏Tool→Alignwith other Sequences或Alignwith Copied Sequences,如下图所示:
2.在当地文件中将需要比对的序列峰图全部选中,点击打开
3.得到如下比对结果,点击sequence可以看出每一个样品的碱基缺失状况:
点击箭头,查询峰图
相比于譬如BioXM、Seqman……,SnapeGene在序列比对功能上愈加智能,达成了同时比对多种序列和查询峰图等功能。
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